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DpnI 来源于携带从肺炎双球菌 G41 克隆的 DpnI R 基因的大肠杆菌。DpnI 限制性内切酶可有效识别并切断腺嘌呤甲基化的 GmATC,而不能切断非甲基化的 GATC 序列。能够切断来源于常用E.coli(dam+)的 DNA;不能切断 PCR 产物。不受 dam mathylase 影响。该产品可广泛应用于分子克隆、基因分型、DNA 印迹、RFLP 技术、SNP 等多项技术领域。
5' G Am6 ↓ T C 3'
3' C T ↑ Am6 G 5'
组成 | E101(500U) | E101(1000U) |
---|---|---|
Dpn I(10U/μl) |
50 μl
|
100 μl |
10X Dpn Buffer | 500 μl | 1ml |
-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
RNase残留检测:20U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30min,RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测:50 μl 体系中,以 ddH2O 为模板,扩增 E. coli 16 s rDNA基因。30个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳,染色,无扩增条带。
1、DpnI需要在识别序列中存在N6甲基腺嘌呤
2、DpnI只会切割完全腺苷甲基化的位点。半腺苷甲基化的dam位点DpnI的分裂速度慢60倍。
3、DpnI、Bsp143I和MboI都识别同一序列,但甲基化敏感性和裂解位点不同。
关键词:
Dpn I
核酸酶
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