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【R101】 M-MLV (H-) Reverse Transcriptase（耐受65℃）
售价
300.0
元
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产品编号
R101
数量
-
+
库存:
999
产品描述
说明书
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产品简介
M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase (Moloney Murine Leukemia Virus，莫洛尼鼠白血病病毒) 通过对野生型M-MLV 逆转录酶基因改造，在大肠杆菌中表达纯化而成，具有依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶活性；依赖于DNA 的 DNA 聚合酶活性；无 RNase H 活性。本品具有合成能力高，热稳定性好和半衰期长的特点。与常见的通过删除 RNase H 结构域方法得到的突变体相比，本产品保留了完整的蛋白结构，因此具有与野生型相同的聚合酶活性，可用于较长的 cDNA 合成以及全长 cDNA 文库的构建等，同时具有链置换活性，可用于 5’ RACE 等实验。
产品组成
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组分
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R101 ( 10,000 U )
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5 × RT Buffer
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500 μl
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M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase (200 U/µl)
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50 μl
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储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
单位定义
以 Poly (rA)·Oligo (dT) 为模板/引物，在 37℃，10 min 条件下，掺入 1 nmol 的 dTTP 为酸不溶性物质所需要的酶量定义为 1 个活性单位 (U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测：
200 U 本品和 50 pmol 单链 DNA 底物在 37℃下孵育 16 h，经变性 PAGE 电泳，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：
200 U 本品和 0.5 μg 质粒 DNA 在 37℃下孵育 4 h，经琼脂糖凝胶电泳，质粒的电泳谱带不发生变化。
RNase 残留检测：
200 U 的本品和 1 μg RNA 在 37℃下孵育 30 min，经琼脂糖凝胶电泳，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌 DNA 残留检测：
60 U 本品中残留的核酸经 E.coli gDNA 特异性的 qPCR 检测，E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。
功能检测：
逆转录体系中加入 200 U 本酶，以 1 μg 总 RNA 为模板，Oligo (dT)18为引物，42℃反应 45 min。取 1/10 cDNA产物进行 PCR 扩增 VIN 基因。琼脂糖凝胶电泳，EB 染色，可见有单一的 4.6 kb 条带。
关键词:
M-MLV (H-) Reverse Transcriptase（R101）
M-MLV
逆转录酶
反转录酶
cDNA
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