生物试剂
Endonuclease IV(Nfo)货号： E303，来源于 E.coli，参与 DNA 损伤修复。该酶可识别双链 DNA 分子上的 apurinic/apyrimidinic (脱嘌呤/脱嘧啶)位点， 简称 AP 位点; 并切割 AP 位点 5′端的第一 个磷酸二酯键， 产生 3′-羟基和 5′-脱氧核糖磷酸; Nfo 还具有 3′-二酯酶活性， 能从 DNA 的 3′ 末 端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5′ -磷酸和磷酸。该酶还具有 3′-5′的外切酶活性。本制品可 与本公司等温扩增系列产品同步使用。
单位定义
在 10µl 的总反应体积中，37°C 孵育 1h，切割 1 pmol 含有单个 AP 位点*的 34bp 寡核苷酸双链所 需的酶量定义为 1 个活性单位 (U)。
AP 位点是在 10 pmol 的 34bp 含有单个尿嘧啶残基的寡核苷酸双链中加入 1U 单位的 UDG 酶， 37°C 反应 2min 获得。
Storage Buffer
10 mM Tris-HCl, 250 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 200 µg/ml BSA, 50% Glycerol, 0.15% Triton® X- 100, pH 7.4 @ 25°C
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组 分 |
E303 |
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Endonuclease IV (Nfo) (10U/μl) |
100 μl |
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10 ×Nfo Buffer |
1 ml |
-20°C 保存。
核酸内切酶残留检测： 20 μl 反应体系， 10 U 本品和 1 μg PUC19 ，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱 带无变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测： 50 μl 体系中， 以 ddH2O 为模板， 扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。 30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色， 无扩增条带。
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