生物试剂
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Cas12a来源于大肠杆菌重组表达，是一种由 41-44 个核苷酸的引导RNA (gRNA)引导的特异性位点 DNA内切酶。Cas12a蛋白作用时，需要设计一个与靶位点互补的gRNA以及有与靶序列相对的DNA链上的5’TTTV (PAM)。Cas12a 蛋白在gRNA引导下会在PAM位点下游约 18 个碱基 3’处进行酶切，并产生5’突出端。
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组 分 |
E401 |
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Cas12a (0.5μg /μl) |
100 μl |
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10×Cas Buffer |
1 ml |
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
核酸外切酶残留检测： 20 μl 本品和 0.6 μg λDNA 在 74℃下孵育 1 小时， DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测： 20 μl 反应体系， 10 U 本品和 1 μg PUC19 ，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测： 50 μl 体系中， 以 ddH2O 为模板， 扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。 30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色， 无扩增条带。
关键词:
Cas12a
核酸酶
CRISPR
【E401】
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