生物试剂
RNase HII 来源于含有RNase HII基因与特殊融合标签共表达载体的大肠杆菌E.coli重组发酵表达,经过切除特殊融合标签后获得RNase HII蛋白。太阳集团tyc9728凭借着敏锐的市场判断及强大的研发能力,推出了以RNase HII 为核心酶的LAMP高灵敏度探针法检测试剂方案,避免假阳性产生的同时,检出灵敏度低至2 copies/test。
组 分 | E207(250 U) |
RNase HII (5 U/μl) |
50 μl |
10 × HII Reaction Buffer |
2 × 750 μl |
1、LAMP高灵敏度探针法检测
2、切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸
3、冈崎片段RNA部分的降解
4、配合End I可特异切割嵌入有核糖核苷酸的dsDNA,造成双链断。
以国家标准SARS-CoV-2 RNA的稀释液为模板(1000 copies/ml和200 copies/ml),反应体系中添加量均为10 μl,使用ATGScript one Step RT-LAMP Basic kit (ATG#M502)结合RNase HII (ATG#E207)和特异性的探针进行检测,极大避免假阳性产生的同时,检出灵敏度低至2 copies/test。
核酸外切酶残留检测:200 U 本品和 50 pmol 线性 DNA 底物在 37℃下孵育 16 h,经琼脂糖凝胶电泳,DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.5 μg质粒DNA在37℃下孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,质粒的电泳谱带不发生变化。
RNase 残留检测:分别取1μl和2 μl的本品和 1 μg 单链RNA 在 37℃下孵育 30 min,经琼脂糖凝胶电泳,RNA 的电泳谱带不发生变化,即无RNase残留。
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